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针对实验大小鼠,高效构建肥胖模型(DIO)
人阅读 发布时间:2024-03-29 16:48
有没有高脂饲料?
高脂饲料类型千千万,要什么脂肪含量的,需要额外加胆固醇、胆酸钠吗,构建什么疾病模型的?
诱导肥胖模型的饲料有没有?
真的是构建肥胖模型吗?需要血生化指标异常吗,需要出现并发症吗?
…………
划重点➡➡➡➡你以为的肥胖模型不一定是真正的肥胖模型!!!
想高效构建大小鼠建肥胖模型(DIO),首先一定要确定是否是单纯性肥胖模型!
高脂饮食构建肥胖模型,血糖呈现先上升后下降的趋势,很难一直稳定在很高水平,所以:肥胖模型≠指标异常。
因此一般单纯是高热量摄入引起的肥胖,称为饮食诱导的肥胖模型(DIO, Diet induced obesity)。
肥胖模型的动物选择
推荐使用C57BL/6J雄性小鼠。有实验数据表明,雌鼠肥胖造模效果慢,成模难。
造模周期
一般8-12周,12周最佳。
通常情况:6周龄(20g左右)C57BL/6J小鼠开始造模,饲喂高脂饲料至13-14周龄,体重可达35g;饲喂至16周龄体重可达40g左右;饲喂至20周龄体重可达46g-48g左右。
饲料选择
小鼠推荐使用60%脂肪供能高脂饮食(脂肪含量35%)。
大鼠推荐使用45%脂肪供能高脂饮食(脂肪含量24%)。
饲喂时让其自由采食即可,注意采食量数据和体重数据监测。测量肥胖相关指标:记录小鼠体长,根据公式计算:Lee‘指数=体重(g)/体长(cm)*103
选对饲料很重要,用对了更重要!!
日常饲喂
1)饲养密度控制:如小鼠,建议3-5只每笼,3只最佳;
2)饲喂方式:每2-3天更换饲料一次,并将笼盒剩余的饲料全部替换掉,保持新鲜度;环境温度24-25℃利于增肥;
3)勤换垫料:舒适的生活环境也至关重要,优先选用优质刨花垫料,一周1-2次更换必不可少,若发现实验动物采食量减少,饲料损耗加大,笼内垫料中出现较多碎料,建议及时更换垫料,可以有效改善;
4)高脂饲料饲喂注意:因其颗粒软,啮齿类动物需要磨牙,建议放置磨牙棒或者定期剪牙齿,这样也能减少了饲料的浪费;
5)减少人为干扰:灌胃、采血、注射等实验操作,一定程度上会影响实验动物的生理状态,导致采食量下降,生长受助;如非必须,应尽量减少。
如何进行有效储存
1)4度冷藏保存3个月,-20冷冻保存6个月;
2)4度放置的可直接投喂,-20度冷冻的需提前一夜放置冷藏解冻后才能投喂;
3)如没有足够的冰箱空间,若不是高脂纯化型饮食,常温下(温度30℃以内,湿度75%以下),且饲料处于经过灭菌、真空状态,可放置一个月,但已开封必须冷藏保存。
其他注意事项
1)采食量监控很重要,每次换食需要记录;
2)若采食量趋于稳定,突然某个阶段出现明显下滑,有可能是进入了厌食期(多发于高脂饲养),或者是哪个环节出现问题,需要排查;
3)整个实验周期,实验动物的状态需要多加关注,毛色、体重等。