有理有据！多种方式构建非酒精性脂肪肝模型，及其实验结果！

脂肪肝分为酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪肝。

非酒精性脂肪性肝病，是指以肝脏脂肪变性为主要特征的临床病理综合征，包括非酒精性脂肪肝，也称单纯性脂肪肝（NAFL），以及由其演变的脂肪性肝炎（NASH）、脂肪性肝纤维化、肝硬化，甚至肝癌。

目前，非酒精性脂肪性肝病已经是西方国家和我国最常见的肝脏疾病，病因较多，比如高热量饮食，含糖饮料，久坐少动等生活方式，肥胖、二型糖尿病、高脂血症、代谢综合征等也会引起非酒精性脂肪肝。

单纯性的高热量饮食可达肥胖症程度，进而形成脂肪肝。

造模方式：小鼠一般常用XTHF60（60%脂肪供能），大鼠使用XTHF45（45%脂肪供能），造模周期10-12周，但不适用于NASH模型构建。

高脂高果糖高胆固醇饮食能模拟人类疾病形成机制，但周期比较长。

造模方式：大、小鼠使用XT301（起酥油版本）或者XT310（棕榈油版本），动物不会很胖，造模周期14周左右，可用于NASH模型构建。

蛋氨酸限制、胆碱缺乏饮食：成模周期短，肝炎、肝纤维化。

造模方式：

1. MCD（蛋氨酸、胆碱缺乏饮食），MRCD（蛋氨酸微量、胆碱缺乏饮食），造模周期4-8周，实验动物状态较差、逐渐消瘦，甚至死亡；

2. HFMRCD（45%脂肪供能或60%脂肪供能基础，蛋氨酸微量、胆碱缺乏饮食），造模周期4-6周，实验动物可有效保持体重，生存周期也会延长。

    

由于蛋氨酸含量正常，用胆碱缺乏饮食诱导疾病模型的成模速度比MCD要慢一些，但试验动物体重仍旧保持逐渐增加，精神保持良好。

造模方式：建议HFCD（高热量基础上胆碱缺乏），造模周期8-10周，14-16周发展至肝纤维化。

1. 生理学指标：肝指数=肝脏湿重（g）/体重（g）*100%；

2. 生化指标：肝脏总脂、血浆游离脂肪酸、血糖、血浆胰岛素、ALT、AST、TC、TG等的含量检测；

3. 形态学方面：肝组织切片染色，观察是否有脂肪沉积、炎症、炎性细胞浸润、坏死、线粒体损伤、胶原染色观察等等。

*注：

图1 小鼠肝脏组织肝小叶与汇管区结构正常，肝索排列整齐。正常肝组织肝索以中央静脉为中心，呈放射状排列，细胞形态清晰。

图2小鼠肝脏组织出现了大量的脂肪空泡，小鼠肝脏组织肝小叶与汇管区结构异常，肝索消失。

图3 MRCD60饮食引起小鼠出现肝脂肪变性及肝小叶炎性浸润。

图4 肝小叶结构紊乱、肝细胞胞浆内以小泡性脂肪病变为主。

*注：

图6油红O染色显示，MCD组小鼠肝组织内出现了大量、形态大小不一的红色脂滴沉积。

图7油红O染色结果显示，MRCD60饮食引起小鼠出现大量的脂肪累积。

图8油红O染色结果显示，CD60组小鼠肝脏组织几乎全部红染。

1. 纯饮食构建非常难，周期特别长，10-12个月左右；几乎没人用；

    

2. DEN或者CCL4注射造成肝损伤+CD饮食辅助造模，比较常用，成模率很高。

1. NASH病人当中，无肥胖的30%左右，肥胖的占70%左右，如果研究的是肥胖伴有NASH，那么，肥胖是必须条件之一；

    

2. 模型构建方法众多，研究从不同的角度出发，模型饲料选择也会不同；

    

3. 不同的实验动物品种和性别对于NASH模型的建立有一定的差别；

    

4. 只有充分沟通整套实验方案，才能更加有利于模型饲料的推荐；

    

5. 千万不要忘了，只有纯化型饮食才能设计CD、MCD、MRCD哦！

    

个人认为：模型构建难度：⭐⭐⭐⭐