非酒精性脂肪性肝病，是指以肝脏脂肪变性为主要特征的临床病理综合征，也称单纯性脂肪肝（NAFL），以及由其演变的脂肪性肝炎（NASH）、脂肪性肝纤维化、肝硬化，甚至肝癌。

目前，非酒精性脂肪性肝病已经是西方国家和我国最常见的肝脏疾病，病因较多，比如高热量饮食，含糖饮料，久坐少动等生活方式，肥胖、二型糖尿病、高脂血症、代谢综合征等也会引起非酒精性脂肪肝。

 

非酒精性脂肪肝如何构建？有哪几种方式？

01

单纯性的高热量饮食，能够达到肥胖症程度，进而形成脂肪肝。

 

造模方式：小鼠一般常用D12492（60%脂肪供能），大鼠使用D12451（45%脂肪供能），造模周期10-12周，但不适用于NASH模型构建。

 

02

高脂高果糖高胆固醇饮食，模拟人类疾病形成机制，周期较长。

 

造模方式：大、小鼠使用D09100301（起酥油版本）或者D09100310（棕榈油版本），动物不会很胖，造模周期14周左右，可用于NASH模型构建。

 

03

蛋氨酸限制、胆碱缺乏饮食，成模周期短，肝炎、肝纤维化。

 

造模方式：

1）MCD（蛋氨酸、胆碱缺乏饮食），MRCD（蛋氨酸微量、胆碱缺乏饮食），造模周期4-8周，实验动物状态较差、逐渐消瘦，甚至死亡；

 

2） HFMRCD（45%脂肪供能或60%脂肪供能基础，蛋氨酸微量、缺乏及胆碱缺乏饮食），造模周期4-6周，实验动物可有效保持体重，生存周期也会延长。

 

04

胆碱缺乏饮食，由于蛋氨酸含量正常，成模速度慢于MCD，但不会造成实验动物体重下降及短期内死亡的情况。

 

造模方式：建议HFCD（高热量基础上胆碱缺乏），造模周期8-10周，14-16周发展至肝纤维化。

 

肝癌模型该如何构建？

1） 纯饮食构建非常难，周期特别长，10-12个月左右（几乎没人用）；

2） DEN或者CCL4注射造成肝损伤+CD饮食辅助造模，比较常用，成模率很高。

 

成模判定标准？

1） 生理学指标：肝指数=肝脏湿重（g）/体重（g）*100%；

2） 生化指标：肝脏总脂、血浆游离脂肪酸、血糖、血浆胰岛素、ALT、AST、TC、TG等的含量检测；

3） 形态学方面：肝组织切片染色，观察是否有脂肪沉积、炎症、炎性细胞浸润、坏死、线粒体损伤、胶原染色观察等等。

 

注意事项

1、NASH病人当中，无肥胖的30%左右，肥胖的占70%左右。如果研究的是肥胖伴有NASH，那么，肥胖是必须条件之一；

2、模型构建方法众多，研究从不同的角度出发，模型饲料选择也会不同；

3、不同的实验动物品种和性别对于NASH模型的建立有一定的差别；

4、只有充分沟通整套实验方案，才能更加有利于模型饲料的推荐；

5、千万不要忘了，只有纯化型饮食才能设计CD、MCD、MRCD哦！

个人认为：模型构建难度：⭐⭐⭐⭐